Descifrando la diversidad en er loci para la diversificación de la resistencia al mildiú polvoroso en guisantes

Scientific Reports volumen 12, Número de artículo: 16037 (2022) Citar este artículo

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Una corrección del autor de este artículo se publicó el 6 de diciembre de 2022

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La biotecnología agrícola tiene como objetivo escudriñar los cultivos de campo que alimentan a la mitad de la población mundial mejorando sus características agronómicas utilizando diversas herramientas biotecnológicas. Guisante: un cultivo comercial importante, rico en nutrientes, pero frecuentemente infectado con oidio (enfermedad fúngica causada por Erysiphe pisi) que destruye todo el cultivo y causa pérdidas económicas a los productores. Por lo tanto, enfocamos esta investigación para encontrar las líneas de guisantes resistentes a patógenos y descifrar aún más la diversidad en el locus er entre las líneas de guisantes resistentes. La detección de líneas de guisantes resistentes se realizó con aislamientos de Erysiphe pisi (presentación de Genebank: KX455922.1) en condiciones de invernadero y casa de red. Los estudios moleculares revelaron que el gen resistente a Erysiphe (er1) estaba presente en 40 líneas de 50 líneas de guisantes seleccionadas y el carácter mutacional se confirió a 36 genotipos con 11 grupos de haplotipos. Se encontró que la diversidad de haplotipos (gen) (Hd) era de 0,5571 ± 0,099 SD y la diversidad de nucleótidos (Pi) era de 0,0160 ± 0,0042 SD La mayoría de las líneas resistentes (67 %) ocurrieron en Hap-1, otros haplotipos restantes (Hap 10) que tienen un 33 % de líneas resistentes, cada una de las cuales muestra sustituciones de nucleótidos características con respecto al gen de referencia PsMLO1; los genotipos de estos haplotipos divergentes se pueden utilizar en el mejoramiento de la resistencia de los guisantes para evitar la homogeneidad genética y la vulnerabilidad genética.

En esta era de pandemia mundial, podemos precisar que las instalaciones médicas se conviertan en la prioridad para el salvador de la vida de toda la comunidad. Aunque esta es una charla universal, para alimentar a toda la comunidad, la agricultura juega un papel igual e importante en el bienestar y el sustento de las personas a nivel mundial. Mirando hacia atrás en la historia para superar esta situación pandémica, podemos profundizar en el papel de varios cultivos agrícolas y hortícolas para aumentar la inmunidad contra diversas enfermedades, por ejemplo, la cúrcuma, el ajwain, el jengibre, el ajo, entre los vegetales, el brócoli (anticanceroso), el limón (vit c), y todas las verduras de hoja verde (ricas en hierro). Los cultivos no solo son conocidos por su valor nutritivo; sino también proporcionar economía a los agricultores. Estos cultivos se cultivan en todo el mundo según sus condiciones geográficas y climáticas. Si comenzamos nuestro viaje desde el noroeste del Himalaya, prestamos atención a la cosecha de guisantes (Pisum sativum) que se ha cultivado durante muchos siglos para obtener vainas y granos verdes para satisfacer las demandas nutricionales y la mejora económica de los productores. Nutricionalmente, el cultivo de guisantes comprende proteínas (25%), almidón de digestión lenta (50%), azúcares (12%), aminoácidos, carbohidratos, vitaminas (A y C), calcio y fósforo1 junto con lisina2. Una característica interesante de este cultivo que aumenta su valor como un cultivo vegetal, puede ser enlatado, congelado, deshidratado o secado y así se convierte en un cultivo de legumbres. Al ser monumental, se han tomado varias medidas preventivas para la protección de cultivos que se produjeron debido a estreses bióticos y abióticos. El mildiú polvoroso del guisante es uno de los estreses bióticos comunes, que es causado por Erysiphe pisi DC ex. Saint-Amans reduce el rendimiento de los cultivos hasta en un 50 por ciento al afectar la calidad y cantidad de vainas verdes y semillas secas de guisantes3,4. El manejo de esta drástica enfermedad se convierte en una compulsión porque el patógeno no solo afectó el grano y las vainas, sino que también redujo el follaje de los guisantes hasta en un 33–69 por ciento5. Banyal et al.6 desarrollaron cultivares resistentes a enfermedades mediante el estudio de la variabilidad patógena de E. pisi entre varias variedades de guisantes. Estas líneas resistentes tienen un locus er (resistente a Erysiphe) que tiene el gen MLO (responsable del mecanismo de resistencia en el guisante) que se detectó usando varios enfoques moleculares. La presente investigación, por lo tanto, se llevó a cabo para encontrar la presencia del gen MLO entre cultivares resistentes seleccionados de guisante y descifrar la diversidad del gen er presente entre estos cultivares resistentes.

Las características morfológicas, a saber, hifas, conidios, conidióforos, tamaño de conidios y células del pie de conidióforo, se estudiaron en las hojas desprendidas del huésped utilizando un microscopio estereoscópico con zoom (Fig. 1; Tabla 1). Attanayake et al.7 describieron dos grupos de patógenos del guisante infectados por oidio en una combinación de características morfológicas y moleculares. La amplificación por PCR reveló un amplicón de aproximadamente ~ 560 pb (Fig. 2) que se purificó en gel y se liofilizó antes de la secuenciación. El análisis BLAST de las secuencias de los aislamientos de prueba P-1 (de guisante) y P-2 (de trébol) indicó que ambas cepas se colocaron en el linaje filogenético ocupado por el género Erysiphe junto con las especies, pisi y trifolii, respectivamente (Fig. . 2) (https://v3.boldsystems.org/index.php/IDS_BlastRequest). La cepa de la secuencia de ARNr 18S se ha depositado en el NCBI GeneBank (números de acceso KX455922 y KX455923, respectivamente).

Los cleistotecios de Erysiphe pisi que causan el mildiú polvoroso del guisante se forman durante la reproducción sexual, aparecen como esféricos, gregarios, de color marrón oscuro, miden alrededor de 87,5–133 µm de diámetro y se dispersan en la red de micelio.

Región de rDNA amplificada usando cebadores específicos de Erysiphe-EryF(5'-TACAGAGTGCGAGGCTCAGTCG-3') EryR (5'-GGTCAACCTGTGATCCATTGTGACTGG-3') (M: escalera de 1 Kb; aislados fúngicos (P1-P24 SUPERIOR) P-1 y P-2 junto con la filogenia del árbol de P-1: Erysiphe pisi, P-2: Erysiphe trifolii (INFERIOR).

Previamente, se realizó una selección y se cruzaron 3 líneas resistentes seleccionadas con JI-2302 (er1) y JI-2480 (er2) en 8 combinaciones cruzadas, a saber, JI-2480 × Acacia, JI-2480 × PMR-10, JI- 2480 × EC-381866–1, JI-2480 × Lincoln, JI-2302 × Acacia, JI-2302 × PMR-10, JI-2302 × EC-381866–1 y JI-2302 × Lincoln bajo casa de malla e invernadero y descripción de la infección se observaron6. La resistencia estuvo regida en los cultivares máximos por la presencia del gen er1 (Cuadro 2). Por lo tanto, seleccionamos el gen er1 para estudios adicionales.

Se utilizaron un total de 50 líneas de guisantes para la extracción de ARN (Fig. 3). El cDNA preparado a partir de RNA se amplificó aún más con cebadores específicos mencionados en el material y los métodos. Para lograr esto, se realizaron PCR repetidas muchas veces en todas las muestras para estandarizar el protocolo. De 50 líneas, la amplificación fue posible con los cebadores 3F y 3R que produjeron 40 amplicones de tamaño variable (300–325 pb) teniendo como objetivo que el gen er1 estuviera presente solo en estas líneas. (Cuadro 3; Fig. 3).

Amplificación de fragmentos de ADN (1–40) de líneas de guisantes seleccionadas. La amplificación fue posible con el cebador Primer PsMLO3F y PsMLO3R produjeron 40 amplicones de tamaño variable (300–325 pb) en diferentes genotipos utilizados. L = Escalera (100 pb).

BLAST N busca la homología de todas las secuencias del gen er1 correspondiente al gen presente en Pisum sativum MLO1 (MLO1) mRNA, cds completo; valores de consultas de homología ≥ 90 % y valores de E cercanos a 0 para el análisis de nucleótidos explosivos. Los análisis filogenéticos separaron las accesiones de guisantes en 3 grupos. El grupo principal A constituyó 32 accesiones y las 8 accesiones restantes se agruparon como 6 y 2 en los grupos B y C, respectivamente. Luego, el árbol obtenido se guardó en formato Newick y se usó el programa Fig Tree para la ilustración del árbol (Fig. 4) (http://tree.bio.ed.ac.uk/software/figtree/).

Árbol NJ basado en secuencias MLO. Las probabilidades posteriores de los principales clados por encima de 0,93 (a) y los valores de arranque en % (b) se indican en los nodos (100). La designación incluye el número y el nombre de las líneas de guisantes.

Se obtuvieron un total de 11 haplotipos y la frecuencia de haplotipos varió de 1 a 24. Hap-1 fue el haplotipo más abundante representando 24 genotipos, incluido el genotipo de referencia (FJ463618.1). Los haplotipos restantes estuvieron representados por un solo genotipo excepto Hap-4 que está representado por 3 genotipos (Cuadro 4). El Hap-1 que tiene 23 genotipos mostró un 100 por ciento de similitud con el genotipo de referencia (FJ463618.1), por lo tanto, no tiene ninguna sustitución de base con PsMLO1, mientras que Hap-2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 , 10 y 11 tienen 9, 5, 1, 6, 6, 16, 15, 14, 13 y 6 sustituciones de base, respectivamente.

El análisis de sitios polimórficos se realizó mediante DNAsp VI y se utilizaron un total de 36 secuencias con un total de 198 sitios variables. Los 47 sitios polimórficos incluyeron 18 sitios variables Singleton, de los cuales 17 tenían dos variantes y uno tenía tres variantes. Había 29 sitios informativos de Parsimonia de los cuales 26 eran con dos variantes y tres con tres variantes. El análisis de los sitios polimórficos se estudió más detalladamente utilizando la alineación de secuencias múltiples. El alineamiento de secuencias múltiples se llevó a cabo en MEGA-(software) utilizando la herramienta Clustal W8. Cada haplotipo de los genotipos de guisantes resistentes evaluados se comparó con el genotipo de referencia para cualquier sitio con reemplazo, eliminación y adición (Fig. 5).

Alineación de secuencias del gen MLO (906–1229 pb) de accesiones de guisantes resistentes al mildiú polvoroso que pertenecen al haplotipo 1–11 con la secuencia de referencia FJ463618.1.

La diversidad de haplotipos se calculó usando DNAsp VI donde la diversidad de haplotipos (gen) fue 0,5571 y la diversidad de nucleótidos (por sitio) de 0,01606 (Tabla 5). También se encontró que la prueba de Tajima era estadísticamente significativa con el D-2.09021 de Tajima en P < 0.05. Una red de unión a la mediana inferida de 40 conjuntos de secuencias con 33 no. de haplotipos activos. Se estableció un valor de cero para epsilon (e = 0) para calcular redes dispersas de forma rápida o incremental. El número máximo de mutaciones (29) se encontró en el carácter 941 y la menor no. de mutaciones (1) oscilaron entre los caracteres 992–1190 (Fig. 6).

Red de unión mediana con vector mediano (puntos de color rojo), caracteres mutados (taxones de color rojo) y frecuencia de secuencia (puntos de color amarillo).

Las legumbres son cultivos que se producen principalmente después de los cereales y el guisante de campo (Pisum sativum) es uno de los cultivos más extendidos9. Hasta la fecha se han realizado diversas investigaciones para el manejo del oídio en plantas de arveja10,11,12. Para el manejo a largo plazo y el aumento de la producción, se requiere desarrollar plantas de cultivo genéticamente resistentes13. Además, el conocimiento de los recursos de germoplasma y los caracteres que contribuyen al rendimiento son necesarios para comprender la diversidad genética14. Conociendo la importancia de este cultivo vegetal mediante la exploración de la literatura, por lo tanto, continuamos nuestra investigación determinando la diversidad de líneas de guisantes resistentes a patógenos en er loci15, que se examinaron in vitro16. La recolección y perfilado de ADN del patógeno causante del mildiú polvoroso17,18 corresponde al género Erysiphe con las especies pisi y trifoli, respectivamente7,19,20. La región noroccidental del Himalaya es el punto de mayor incidencia de oídio16. La etapa sexual de un patógeno (cleistotecia) frecuentemente se forma solo en la zona templada seca21 indicando la presencia de la virulencia patógena de E. pisi en la Zona IV del Himalaya. El estudio de la variabilidad patogénica de E. pisi es el más importante para el mejoramiento de variedades resistentes. Las variedades resistentes evolucionaron contra el mildiú polvoroso del guisante y se vuelven susceptibles al poco tiempo, lo que indica la existencia y selección para la aparición de nueva virulencia de E. pisi. Por lo tanto, el estudio de la variabilidad patogénica ha sido requerido para el manejo exitoso de la enfermedad a través de la identificación, desarrollo y despliegue de fuentes/variedades de resistencia en una situación geográfica determinada6,22. Esto podría ser de gran ayuda para nosotros con respecto a la mejora genética, así como en los aspectos de conservación del programa de mejora de cultivos de guisantes. Los resultados experimentales revelaron que los cultivares examinados (que tienen el gen resistente a Erysiphe pisi) cuando se cruzaron con los portadores (JI-2302, JI-2480 (er1 y er2)) se encontraron regidos por la resistencia por un solo gen er1 de la línea portadora resistente JI-2302. (er1) 12, 23, 24, 25, 26. Los genes er 1 y er 2 se pueden considerar como las principales bases resistentes naturales 10, 27, 28, 29 contra el patógeno del mildiu polvoriento, por lo que se introgresaron en líneas posteriores de guisantes. Aunque el gen er2, que también confería resistencia, los cultivares de guisantes máximos revelaron la presencia del gen er1 que confiere resistencia contra el mildiú polvoroso 12, 25, 26. El gen er1 obtenido en líneas de guisantes resistentes se aseguró aún más utilizando un enfoque molecular de mutagénesis aleatoria natural en Mildew Locus O (MLO) en muchas monocotiledóneas/dicotiledóneas34 que condujo a mutaciones naturales de pérdida de función Los informes sugieren que esta mutación se vuelve beneficiosa para que el huésped termine la invasión fúngica en el primer paso, creando así resistencia . En el caso de Pisum sativum, el gen PsMLO1 presente en el cultivo proporciona una resistencia amplia y duradera contra el patógeno del oídio35, actuando así como un gen candidato para revelar la diversidad alélica entre las líneas de guisantes resistentes. La amplificación con cebadores (PsMLO3FP y PsMLO3R) reveló que los candidatos pueden identificarse durante las primeras etapas de la infección por E. pisi36. En los casos de tomate37, cebada38, pimiento39 y vid40,41, la expresión del gen resistente aumentó en respuesta al patógeno dentro de las primeras 24 h y se obtuvo un pico de resistencia alrededor de las 6 h. De manera similar, después de la infección de E. pisi, la resistencia se desarrolló en las líneas de guisantes después de 4 a 8 días, lo que se observó morfológicamente y se registraron las tasas de resistencia y susceptibilidad42. Durante el análisis filogenético, encontramos que la mayoría de las secuencias del gen er1 correspondían al gen de referencia (Pisum sativum MLO1), del cual el clado más grande forma parte del grupo principal A y corresponde a ≥ 90 % de similitud con las secuencias de Pisum sativum MLO143,44. Los resultados se encontraron en armonía con los resultados obtenidos por muchos colaboradores35,37. La accesión de líneas de guisantes en un clado principal del grupo A (Fig. 4) que tiene las secuencias MLO1 (análogo del gen er-1) puede usarse directamente en futuros programas de mejoramiento. Según NIH (National Human Genome Research), los haplotipos son combinaciones alélicas (simple/múltiple) en las que el polimorfismo se encuentra muy próximo entre los genes, por lo que se heredan juntos sin ninguna recombinación, y posteriormente se utilizan en estudios genéticos. El enfoque basado en haplotipos utilizado para la identificación de diversidad genética en cultivares de trigo harinero (Triticum aestivum) ha sido ampliamente utilizado por muchos científicos45, por lo que se ha convertido en una técnica útil en los programas de mejoramiento de cultivos. Encontramos un total de 11 grupos de haplotipos donde la frecuencia de haplotipos varió de 1 a 24. Entre estos grupos, Hap-1 fue el haplotipo más abundante, representando 23 genotipos, incluido el genotipo de referencia (FJ463618.1), que no reveló base. sustitución contra PsMLO1. Los genotipos que tienen el gen er1 agrupado en Hap-1 representan los alelos resistentes transmitidos desde portadores resistentes unidos entre sí sin ninguna sustitución. En el caso de Hap-2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10 y 11 encontramos sustituciones de bases de 9, 5, 1, 6, 6, 16, 15, 14, 13 y 6 , respectivamente en el locus MLO, que muestra la diversidad en las sustituciones del gen er1 (Fig. 5). Cada haplotipo de los genotipos de guisantes resistentes evaluados se comparó con el genotipo de referencia para cualquier sitio con reemplazo, deleción y adición. Los genotipos de estos haplotipos divergentes se pueden utilizar en el mejoramiento de la resistencia de los guisantes para evitar la homogeneidad genética y la vulnerabilidad genética. En el caso del cultivo de frutas, se pueden utilizar cultivares divergentes para la domesticación de cultivares de lichi de maduración temprana y tardía46. Los cálculos estadísticos revelaron una diversidad de haplotipos de 0,5571 ± 0,099 SD y una diversidad de nucleótidos (Pi) de 0,0160 ± 0,0042 SD. Un valor bajo de nd (0,01606) y un valor negativo de D de Tajima -2,09021 a P < 0,05 (estadísticamente significativo) revelaron que estas líneas resistentes no pueden verse afectadas por las condiciones ambientales. Se encontró que la diversidad de nucleótidos (nd) de las variedades cultivadas de las accesiones de arroz coreano (maleza = 0,0102, raza local = 0,0093 y mejorada = 0,0066) era más baja y no reveló reducción en la diversidad durante la domesticación47. Para ilustrar los datos moleculares para estudios intraespecíficos, se utilizaron previamente varias redes de haplotipos 48. En términos simples, estas redes brindan información sobre la estructura de la población, la migración y la creación de nuevas especies49. Aquí, dibujamos una red de unión media (MJN) de haplotipos con caracteres mutados (Fig. 6). La literatura apoyó que el método MJ requería el mínimo no. de mutaciones, lo que arrojó una buena genealogía50. Además, este enfoque de MJ funcionó correctamente cuando los haplotipos estaban comparativamente distantes51 y mostraron una buena construcción de red con bajas tasas de sustitución52. Kong et al.53 discutieron el uso de redes de unión mediana en el campo de la biología evolutiva. Nuestra red MJN reveló la presencia del gen er1 en la gran mayoría de las líneas que compartían un haplotipo idéntico con el gen de referencia PSMLO1, lo que sugiere que estas líneas se originaron a partir de un ancestro común.

Todos los materiales recopilados y la metodología diseñada para la investigación estuvieron de acuerdo con las directrices y regulaciones pertinentes.

Se recolectaron un total de 24 aislamientos de mildiú polvoroso causante de patógenos en el noroeste del Himalaya, de los cuales se recolectaron aislamientos máximos de 15 ubicaciones diferentes en la región transhimalaya de Lahul Spiti. Estos fueron purificados y mantenidos en un invernadero para estudios posteriores. El patógeno que causa el mildiú polvoroso del guisante se identificó sobre la base de características morfológicas, a saber, hifas, conidios, conidióforos, tamaño de los conidios y células del pie de conidióforos. Además, se realizó un análisis polifásico de la tensión en la región del espaciador transcrito interno (ITS) del ADN ribosómico nuclear (ADNr). La secuencia obtenida se envió al banco de genes del NCBI para obtener el número de acceso.

La detección de resistencia contra patógenos fúngicos identificados se realizó a partir de un panel de 310 líneas de guisantes que comprendían germoplasma autóctono y exótico recolectado de diferentes fuentes (CSK HPKV Palampur, NBPGR Nueva Delhi, PAU Ludhiana e IIPR Kanpur) y se evaluaron en net-house así como en hojas desprendidas en condiciones in vitro54. Las líneas resistentes identificadas junto con las susceptibles se cruzaron con genes recesivos conocidos er1 y er2 presentes en las líneas JI-2302 (er1) y JI-2480 (er2) bajo invernadero. Además, se seleccionaron cultivares que tenían resistencia a los genes er respectivos para determinar la diversidad alélica en el locus er.

Se seleccionaron un total de 50 líneas de guisantes para el aislamiento de ARN utilizando el método trizol55. El ARN se extrajo de hojas frescas (sin inoculación de Erysiphe pisi) y se inocularon hojas después de 4 y 8 días de inoculación fúngica (Erysiphe pisi).

Se usaron 40 ug de ARN para la amplificación de ADNc usando un potenciador de transcriptasa inversa, tampón de ADNc 5 ×, mezcla de dNTP (5 Mm cada uno) y enzima verso según las instrucciones recomendadas en el kit de ADNc de enzima Verso. La mezcla de reacción de PCR se incubó a 42 °C durante 30 min. Además, la reacción se terminó a 95 °C durante 2 min. Para la amplificación del ADNc, las placas de PCR se llenaron con una mezcla de reacción que contenía tampón 5X, MgCl2 25 mM, dNTP 10 mM, 0,5 mM de cada cebador PsMLO diseñado específicamente (Tabla 6), ADN polimerasa Taq 5U con ADNc molde. El perfil de amplificación consistió en 1 ciclo a 95 °C/5 min; 37 ciclos a 95 °C/30 s, 50 °C/30 s y 72 °C/1 min 20 s; 1 ciclo a 72 °C/7 min; mantener a 4 °C/∞. Los productos de la PCR se separaron en gel de agarosa (1,2 %) y los amplicones seleccionados se purificaron y secuenciaron en SciGenome Labs Private Ltd. Cochin, Kerala, INDIA.

La homología de las secuencias de genes se analizó utilizando herramientas bioinformáticas en línea disponibles en la base de datos NCBI en el programa FASTA. BLASTN se utilizó para la comparación de secuencias en la base de datos genómica NCBI (http://www.ncbi.nlm.nih.gov/blast/Blast.cgi). El análisis filogenético se realizó en MEGA 5.056 y los parámetros genéticos, como la diversidad de haplotipos y el número total de mutaciones, el polimorfismo de Indel se calcularon utilizando DnaSP versión 5.1057. Network v 4.61 se utilizó para construir una red de unión media (MJ)58 de los haplotipos (http://www.fluxus-engineering.com).

Para el manejo de enfermedades fúngicas en los cultivos, se utilizan con frecuencia muchas estrategias que incluyen enfoques convencionales y no convencionales. A partir de nuestra investigación, identificamos los cultivares resistentes en cultivos de arveja que satisfacen la demanda de agricultores marginales y bajos y reducen el uso de químicos de manera controlada.

Los conjuntos de datos analizados durante el estudio actual están disponibles en el repositorio de NCBI Nucleotide, https://www.ncbi.nlm.nih.gov/nucore/1131300078, https://www.ncbi.nlm.nih.gov/nuccore/1131300079 con números de acceso GenBank: KX455922.1 y GenBank: KX455923.1 respectivamente.

Se ha publicado una corrección de este artículo: https://doi.org/10.1038/s41598-022-25312-0

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Descargar referencias

Los autores agradecen a la agencia de financiación SERB, Departamento de Ciencia y Tecnología del Ministerio de Ciencia y Tecnología, Nueva Delhi, por brindar asistencia financiera durante todo el período para completar la investigación.

Departamento de Patología Vegetal, COA, CSKHPKV, Palampur, HP, 176061, India

Devinder K. Banyal, Himisha Dixit, Anudeep B. Malannavar y Nisha Thakur

Dr. YSPUHF, KVK, Chamba, HP, 17512, India

Jai Chaudhary

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Todos los autores realizaron cada paso de la investigación por igual bajo la supervisión de DKB (Profesor y Jefe, COA, Departamento de patología vegetal, CSKHPKV, Palampur (HP). El autor correspondiente completó la investigación y escribió el manuscrito completo que fue visto por todos los autores. .

Correspondencia a Nisha Thakur.

Los autores declaran no tener conflictos de intereses.

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Se revisó la versión original en línea de este artículo: En la versión original de este artículo, Himisha Dixit estaba incorrectamente afiliado al 'Centro de Biología Computacional y Bioinformática, Facultad de Ciencias de la Vida, Universidad Central de Himachal Pradesh, TAB Shahpur, Kangra, HP, 176206 , India'. La afiliación correcta se enumera aquí. Departamento de Patología Vegetal, COA, CSKHPKV, Palampur, HP, 176061, India.

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Reimpresiones y permisos

Banyal, DK, Dixit, H., Chaudhary, J. et al. Descifrando la diversidad en er loci para la diversificación de la resistencia al mildiú polvoroso en el guisante. Informe científico 12, 16037 (2022). https://doi.org/10.1038/s41598-022-19894-y

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Recibido: 07 enero 2022

Aceptado: 06 septiembre 2022

Publicado: 26 septiembre 2022

DOI: https://doi.org/10.1038/s41598-022-19894-y

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